DIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL)
DIN EN ISO 15216-1
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Horizontales Verfahren zur Bestimmung von Hepatitis-A-Virus und Norovirus mittels Real-time-RT-PCR - Teil 1: Verfahren zur Quantifizierung (ISO 15216-1:2017); Deutsche Fassung EN ISO 15216-1:2017
Microbiology of the food chain - Horizontal method for determination of hepatitis A virus and norovirus using real-time RT-PCR - Part 1: Method for quantification (ISO 15216-1:2017); German version EN ISO 15216-1:2017
Einführungsbeitrag
Hepatitis-A-Viren (HAV) und Noroviren sind wichtige Erreger von lebensmittelbedingten Viruserkrankungen beim Menschen. Bislang gibt es keine Routineverfahren zur Kultivierung dieser Viren aus Lebensmittelmatrices und der Nachweis ist deshalb auf molekulare Verfahren unter Anwendung der Reverse-Transkription-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) angewiesen. Da viele Lebensmittelmatrices Substanzen enthalten, die sich hemmend auf die RT-PCR auswirken, ist es notwendig, ein Extraktionsverfahren zu beschreiben, mit dem hochreine, für den vorgesehenen Zweck geeignete RNA-Präparate erhalten werden. Diese Norm legt ein Verfahren für die quantitative Bestimmung der Gehalte an RNA on HAV und Noroviren der Genoguppen I (GI) und II (GII) in Untersuchungsproben von Lebensmitteln oder Lebensmitteloberflächen. Nach der Freisetzung der Viren aus der Untersuchungsprobe wird die virale RNA durch Lyse mit Guanidinthiocyanat und Adsoprtion an Silica(-Partikeln) extrahiert. Die Zielsequenzen innerhalb der viralen RNA werden amplifiziert und durch Real-time RT-PCR nachgewiesen. Dieses Verfahren ist weder für den Nachweis der Zielviren in anderen Lebensmitteln (einschließlich zusammengesetzter Lebensmittel) oder anderen Matrices noch für den Nachweis anderer Viren in Lebensmitteln, auf Lebensmitteloberflächen oder anderen Matrices validiert. Diese Norm gilt dem gesundheitlichen Verbraucherschutz. Die Norm wurde vom ISO/TC 34/SC 9 "Microbiology" in Zusammenarbeit mit dem CEN/TC 275 "Lebensmittelanalytik - Horizontale Verfahren" erarbeitet, dessen Sekretariat von DIN gehalten wird. Das nationale Spiegelgremium ist der Arbeitsausschuss NA 057-01-06 AA "Mikrobiologie der Lebensmittelkette" im DIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL).
Änderungsvermerk
Gegenüber DIN CEN ISO/TS 15216-1 (DIN SPEC 10051-1):2013-08 wurden folgende Änderungen vorgenommen: a) die Verwendung von linearen dsDNA-Molekülen für die Quantifizierung wird vorgeschrieben; b) die Verwendung eines geeigneten Puffers für die vorgeschriebene Verdünnung von Kontrollmaterialien; c) Änderung des Verfahrens zur Erzeugung von Prozesskontrollvirus-RNA für die Standardkurve; d) Hinzufügen von Haltepunkten mit festgelegter Temperatur und Zeitparametern in den Extraktionsverfahren; e) Änderung der Terminologie von Amplifikationseffizienz zu Inhibition der RT-PCR; f) Hinzufügen von zusätzlichen Real-Time-RT-PCRs für negative Kontrollen; g) Hinzufügen von Präzisionsdaten und Ergebnissen eines Ringversuchs.
Dokument: zitiert andere Dokumente
Zuständiges nationales Arbeitsgremium
Zuständiges europäisches Arbeitsgremium
CEN/TC 463 - Mikrobiologie der Lebensmittelkette
